Possui exposições permanentes e temporárias, incluindo coleções de pintura do século XV e XVI, esculturas da Idade Média e do Renascimento. Além destas coleções apresenta, também, cerâmicas, joalharia e azulejos de diversos períodos, num total de cerca de 20 mil peças. Uma das novidades do novo museu é a sala do retábulo flamengo, que reconstitui cenas da Vida da Virgem, dispostas cronologicamente.

Fundada em 1805, esta biblioteca é uma das mais qualificadas e ricas Bibliotecas Nacionais, visto que possui núcleos impressos e manuscritos do século XIII ao século XX. Além disso, preserva valores arqueológicos e artísticos nas suas instalações.

Évora tem, desde Dezembro 2011, uma extensão do Museu do Relógio de Serpa, no Palácio Barrocal, junto à Praça do Giraldo. São cerca de 400 relógios mecânicos que poderão ser vistos naquele espaço nobre, tal como uma Oficina de Restauro. Fruto de uma paixão de António Tavares d'Almeida, a coleção conta com mais de 2.200 relógios desde 1630 até 2012, e um sem fim de histórias para ver e ouvir.

Espaço que acolhe diversas atividades culturais, nomeadamente exposições de pintura, escultura, entre outros. Conta com uma zona de exposições, um auditório com capacidade para 156 pessoas, uma sala multiúsos com 70 lugares, sala de conferências, loja e cafetaria.

Teatro inaugurado em 1892, de notável arquitetura teatral italiana. Além de funcionar como sala de espetáculo, possui ainda uma escola de formação teatral.

Um espaço que apresenta exposições temporárias de azulejaria portuguesa.

Neste espaço realçam-se a ''Adoração dos Magos'' pintada por Francisco Campos, uma imagem de S. Ana, a Virgem e o Menino, uma escultura designada por ''Virgem com o Menino'', do século XIV, do chamado tipo Virgem Abrideira (fechada é uma imagem da Virgem com o Menino e aberta, acolhe várias figurações do ciclo mariano). Neste espaço poderá também apreciar joalharia, escultura, mobiliário religioso e paramentos do século XVI-XVIII.

Pequeno espaço onde se encontram expostos objetos de medida desde o tempo de Dom Manuel até hoje.